Cytotoxicity/proliferation detection

細(xì)胞毒性/增殖檢測

細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁育和遺傳的基礎(chǔ)，是生物體的重要生命特征。細(xì)胞通常以分裂的方式進(jìn)行增殖。

細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細(xì)胞殺傷事件，不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機理。

細(xì)胞增殖及毒性檢測是生物相容性測試的一種，通過檢測材料或者藥物對細(xì)胞的增殖或者生長的影響，來評價藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定等。

MTT法:

MTT即噻唑藍(lán)，是一種可接受氫離子的黃色有機化合物，可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C等還原為不能溶于水的藍(lán)紫色產(chǎn)物甲臜（formazan）。該產(chǎn)物雖然不溶于水，但可以溶于特定溶劑(如DMSO)。

實驗原理

在特定溶劑存在的情況下，該產(chǎn)物被完全溶解，然后通過酶標(biāo)儀在特定波長（如570nm）條件下根據(jù)吸光度來反映細(xì)胞增殖/毒性情況。

結(jié)果判讀

細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。

CCK-8法:

使用的是WST-8(一種類似于MTT的化合物)，它在電子耦合試劑的作用下可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為高度水溶解的黃色甲臜（Formazan）

結(jié)果判讀

細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。

比對類別	MTT	CCK-8
優(yōu)點	靈敏度較高，價格便宜	1.操作簡單，避免細(xì)胞計數(shù)過程中認(rèn)為因素的影響； 2.CCK-8法的檢測靈敏度很高甚至可以測定較低細(xì)胞密度； 3.可反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，檢測時間靈活，不影響細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實驗； 4.無需放射性同位素和有機溶劑，對細(xì)胞毒性低； 5.CCK-8產(chǎn)生的Formazan是水溶性的，無需換液。
缺點	操作步驟較多，需要使用有機試劑，靈敏度不如CCK-8，多數(shù)需要配置，檢測時間長，細(xì)胞毒性較高。	1.價格較MTT貴； 2.CCK8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，容易漏加或多加。
實驗用途	1.藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測定； 2.細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定。	1.細(xì)胞增殖測定：細(xì)胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到，比如腫瘤相關(guān)、損傷后修復(fù)等。 2.藥物篩選：在測定一個藥物的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。 3.細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。 4.腫瘤藥敏試驗：應(yīng)用最為廣泛。 5.微生物對細(xì)胞的毒性或增殖的實驗。

商品信息	貨號	單價	備注
CCK8檢測	LLJ021	750元/板/時間	不含細(xì)胞株和受檢藥物。4個復(fù)孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對照組，即藥物最多可設(shè)置13組(52-54孔可用)）
MTT檢測	LLJ022	650元/板/時間	不含細(xì)胞株和受檢藥物。4個復(fù)孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對照組，即藥物最多可設(shè)置13組(52-54孔可用)）