甲基化檢測
DNA甲基化通常抑制基因表達(dá)，去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。
檢測原理
BSP甲基化測序（Bisulfite Genomic SequencingPCR）的原理通過對基因組DNA進(jìn)行重亞硫酸鹽處理，非甲基化的胞嘧啶被脫氨基而轉(zhuǎn)變成尿嘧啶，在隨后的PCR反應(yīng)中尿嘧啶轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不能被脫氨基，在反應(yīng)完成時被保留，我們將擴增得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行TA克隆測序，可以分析甲基化發(fā)生的具體情況。該方法實驗結(jié)果準(zhǔn)確性高，是甲基化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。
常規(guī)檢測流程
引物
設(shè)計
設(shè)計
DND
提取
提取
亞硫酸氫鈉修飾
基因組DNA
基因組DNA
修飾后DNA
純化回收
純化回收
修飾后DNA
用于PCR
用于PCR
測序
數(shù)據(jù)
分析
分析
完成
BSP甲基化結(jié)果分析
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